Билет №23.
1) Реакция преципитации (от лат. praecipito — осаждать) — это формирование и
осаждение комплекса растворимого молекулярного антигена с антителами в виде
помутнения, назы-ваемого преципитатом. Он образуется при смешивании антигенов
и антител в эквивалентных количествах; избыток одного из них снижает уровень
образования иммунного комплекса. Реакцию преципитации ставят в пробирках
(реакция кольцепреципитации), в гелях, питательных средах и др. Широкое
распространение получили разновидности реакции
преципитации в полужидком геле агара или агарозы; двойная иммунодиффузия по
Оухтер-лони, радиальная иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез и др.
Реакция кольцепреципитации, Реакцию проводят в узких преципитационных
пробирках: на иммунную сыворотку наслаивают растворимый антиген. При оптимальном
соотноиении-антигена и антител на границе этих двух растворов обэазуется
непрозрачное кольцо преци-питата (рис. 7.50). Если в качестве антигенов в
реакции используют прокипяченные и
профильтрованные экстракты тканей, то такая реакция называется реакцией
термопреципи-тации (реакция Асколи, при которой выявляют сибиреязвенный гаптен).
Реакция двойной иммунодиффузии по Оухтерлони.
Для постановки реакции растопленный агаровый гель тонким слоем выливают на
стеклянную пластинку и после затвердевания в нем вырезают лунки. В лунки геля
раздельно помещают антигены и иммунные сыворотки, которые диффундируют
навстречу друг другу. В месте встречи в эквивалентных соотношениях они образуют
преципитат в виде белой полосы
{рис. 7.51). У многокомпонентных систем между лунками с антигенами и антителами
появ-ляется несколько линий преципитата; у идентичных антигенов линии
преципитата сливают-ся, у неидентичных — пересекаются
Реакция радиальной иммунодиффузии. Иммунную сыворотку с расплавленным агаровым
гелем равномерно наливают на стекло. После застывания в геле делают лунки, в
которые помещают антиген (Аг) в различных разведениях. Антиген, диффундируя в
гель, образует с антителами кольцевые зоны преципитации вокруг лунок. Диаметр
кольца преципитации пропорционален концентрации антигена (рис. 7.52}. Реакцию
используют для определения в сыворотке крови иммуноглобулинов различных
классов, компонентов системы
комплемента и др.
Иммуно-электрофорез — сочетание метода электрофореза и иммунопреципитации:
смесь антигенов вносится в лунки геля и разделяется в геле с помощью
электрофореза, затем в канавку геля параллельно зонам электрофореза вносят
иммунную сыворотку. Антитела иммунной сыво-ротки диффундируют 0 гель и образуют
в месте «встречи» с антигеном линии преципитации (рис. 7.53).
Иммунная электронная микроскопия — электронная микроскопия микробов, чаще виру-
сов, обработанных соответствующими антителами. Вирусы, обработанные иммунной
сывороткой, образуют иммунные агрегаты (микропреципитаты). Вокруг вирионов
образуется «венчик» из антител, контрастированный фосфорно-вольфрамовой кислотой
или другими электроннооптически плотными препаратами.
2)Вирус относится к семейству Herpesvirida, род Simplexvirtis , herpes simplex
virus тип-2
Возникновению рецидивов генитального герпеса способствуют различные факторы:
пере-охлаждение, половые сношения, стрессовые ситуации, переутомление,
возникновение других заболеваний. Например, рецидивы генитального герпеса
нередко возникают на фоне гриппа и других респираторных патологических
процессов. Симптомы генитального герпеса при рецидивах могут быть выражены менее
значительно по сравнению с первичным заболе-ванием. Однако последствия рецидивов
нередко бывают неблагоприятными. При поражении шейки матки, эндометрия и
маточных труб возможно возникновение бесплодия.
Существуют две гипотезы, объясняющие механизмы латенции ВПГ. Согласно первой из
них («статической» гипотезе) вирусы в межрецидивный период находятся лишь в
клетках нервных ганглиев, возможно, в интегративном состоянии. Вторая
(«динамическая») гипотеза предполагает существование в ганглиях
низкорепликативной инфекции с постоянной цир-куляцией вирусов вдоль аксонов и
проникновением небольшого их числа в эпителиальные клетки кожи и слизистых
оболочек. Этот процесс не сопровождается заметными поражения-ми, так как
находится под контролем клеточных и гуморальных факторов иммунитета.
Для диагностики используют содержимое герпетических везикул, слюну, соскобы с
роговой оболочки глаз, кровь, спинномозговую жидкость и мозг при летальном
исходе. В окрашенных мазках наблюдают гигантские многоядерные клетки (синцитий),
клетки с увеличенной цитоплазмой и внутриядерными включениями Каудри. Для
выделения вируса исследуемым материалом заражают клетки HeLa, Нер-2,
человеческие эмбриональные фибробласты. Рост в культуре клеток идет довольно
быстро, и через 24 ч становится видимым ЦПЭ. Он проявляется окру глением клеток
с последующим прогрессирующим поражением всей культуры клеток. Заражают также
куриные эмбрионы или мышей-сосунков, у которых после внут-римозгового заражения
развивается энцефалит. Выделенный вирус идентифицируют в РИФ и ИФА с
использованием монокло-нальных антител.Серодиагностику проводят с помощью РСК,
РИФ, ИФА и реакции нейтрализации по нарастанию титра антител больного. ИБ также
способен выявлять типоспецифичес-кие антитела.При экспресс-диагностике в мазках-
отпечатках из высыпаний, окрашенных по Романовскому—Гимзе, выявляются гигантские
многоядерные клетки с внутриядерными включениями. Для идентификации вируса
используют также амплификацию генов вирусной ДНК в реакции ПЦР.
3) Гонококковая вакцина.
Состав. Гонококковая вакцина содержит взвесь инактивированной культуры
гонококков в 0,9 % -ном растворе натрия хлористого. Один миллилитр вакцины
содержит 1 млрд микроб-ных тел. В качестве консерванта используется фенол.
Вакцина представляет собой мутную жидкость желтоватого цвета с осадком,
состоящим из инактивированной микробной массы гонококков, легко разбивающимся
при встряхивании. Препарат разлит в ампулы по 1 мл, 10 ампул в картонной
коробке.
Назначение — при диагностике (установлении излеченности гонореи) и как
вспомогатель-ный метод лечения гонореи с другими видами терапии. Применение
гонококковой вакцины показано больным безуспешной антибиотикотерапии при вяло
протекающих рецидивах, при свежих торпидных и хронических формах заболевания,
мужчинам с осложненной и женщи-нам с восходящей гонореей (по стихании острых
воспалительных явлений).
Способ введения и дозировка. Вакцину вводят внутримышечно в ягодичную область
или внутрикожно. Перед набором препарата в шприц ампулу с вакциной необходимо
встряхнуть.