Билет №22.
1) Реакция агглютинации (от лат. oggiutinatio — склеивание) — склеивание
корпускул (бактерий, эритроцитов и др.) антителами в присутствии электролитов.
Реакция агглютинации проявляется в виде хлопьев или осадка, состоящих из
корпускул (например, бактерий),
«склеенных» антителами (рис. 7.37). Реакцию агглютинации используют для:
1) определения антител в сыворотке крови боль¬ных, например, при бруцеллезе
(реакции Рай-та, Хеддельсона), брюшном тифе и паратифах (реак¬ция Видаля) и
других инфекционных бо-лезнях;
2) определения возбудителя, выделенного от больного;
3) определения групп крови с использова¬нием моноклональных антител против
алло-антигенов эритроцитов.
1.Определение возбудителя, выделенного от больного Ориентировочная реакция
агглюти-нации нз стекле (рис. 7.38). К капле агглютинирующей сыворотки
(разведение 1:20) добав-ляют взвесь бактерий, выделенных от больного.
Образуется хлопьевидный осадок.
2.. Определение антител в сыворотке крови больного
Развернутая реакция агглютинации с сывороткой крови больного (рис. 7.39). К
разведениям сыворотки больного добавляют диагностикум.
— Агглютинация с О-диагностикумом (бактерии, убитые нагреванием, сохранившие Q-
антиген) происходит в виде мелкозернистой агглютинации.
— Агглютинация с Н-диогностикумом (бактерии, убитые формалином, сохранившие
жгути-ковый Н-антиген) — крупнохлопчатая и протекает быстрее.
3. Реакция агглютинации для определения групп крови .Реакцию агглютинации для
опре-деления групп крови применяют для установления системы АВО (табл. 6) с
помощью
агглютинации эритроцитов антителами иммунной сыворотки против антигенов групп
крови А (II), 8 (III). Контролем служат: сыворотка, не содержащая антител, т.е,
сыворотка АВ (IV) группы крови; антигены, содержащиеся е эритроцитах групп А
(II), В (III). Отрицательный контроль не содержит антигенов, т. е. используют
эритроциты группы О (I),
Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации
В РНГА выявляют антитела сыворотки крови больного с помощью антигенного
эритроци-торного диагностиками, который представляет собой эритроциты с
адсорбированными на них антигенами . Эритроциты (или частицы латекса) с
адсорбированными
на них антигенами взаимодействуют с соответствующими антителами сыворотки крови
{рис. 7,42), что вызывает склеивание и выпадение эритроцитов на дно пробирки
или ячейки ввиде фестончатого осадка.
При отрицательной реакции эритроциты оседают в виде «пуговки» (рис. 7.43).
РПГА ставят в пластиковых планшетках или в пробирках с разведениями сыворотки
крови больного, к которым добавляют эритроцитарный диагностикум.Иногда
применяют анти-тельный эритроцитарный диагностикам — эритроциты, на которых
адсорбированы
антитела (рис. 7.44), Например, можно обнаружить ботупинический токсин, добавляя
к нему эритроцитарный антительный ботулинический диагностикум (такую реакцию
называют
реакцией обратной непрямой гемагглютинации — РОНГА).
Реакцию коагглютинации применяют для определения антигенов с помощью
антительного диагностикума — антител, адсорбированных на белке А клеток
стафилококка .
Белок А имеет сродство к Fc-фрагменту иммуноглобулинов, поэтому такие бактерии,
обра-ботанные иммунной диагностической сывороткой, неспецифически адсорбируют
антитела сыворотки.
Антитела диагностикума взаимодействуют активными центрами с соответствующими
мик-робами, выделенными от больных (рис. 7.46). В результате коагглютинации
образуются хлопья, состоящие из стафилококков, антител диагностической
сыворотки и определяемого микроба.
Реакция Кумбса
Реакция агглютинации для определения антирезусных антител (непрямая реакция
Кумбса). У некоторых больных обнаруживают антирезусные антитела, которые
являются неполными, одновалентными. Они специфически взаимодействуют с резус-
положительными эритроци-тами (Rh+), но не вызывают их агглютинации. Наличие
таких неполных антител определяют в непрямой реакции Кумбса. Для этого в систему
антирезусные антитела + резус-положительные эритроциты добавляют анти глобул и
новую сыворотку (антитела против иммуноглобулинов человека), что вызывает
агглютинацию эритроцитов (рис. 7.47).
С помощью реакции Кумбса диагностируют патологические состояния, связанные с
внутри-сосудистым лизисом эритроцитов, например, гемолитическую болезнь
новорожденных: эритроциты резус-положительного плода соединяются с
циркулирующими в крови непол-ными антителами к резус-фактору, которые перешли
через плаценту от резус-отрицательной
матери. Можно также выявлять неполные антитела против антигенных микробов.
Реакция торможения гемагглютинации
Гемагглютинины вирусов склеивают эритроциты. Это свойство используют в реакции
ге-магглютинации (рис. 7.48) для индикации и титрования вирусов, что необходимо
для
последующей постановки РТГА. Реакция торможения гемагглютинации основана на
блокаде, подавлении антигенов (гемагглютининов) вирусов антитепами иммунной
сыворот-ки, в результате чего вирусы теряют свойство агглютинировать эритроциты.
РТГА применяют для диагностики многих вирусных болезней, возбудители
2) полиомиелита относят к семейству Picornaviridae, роду Enterovirus.,вид
Poliovirus.
Вирус небольших размеров, диаметр вириона 25–30 нм, содержит одну нить РНК.
Сероло-гически различают три (I, II, III) типа вирусов полиомиелита.
заражениеВходные ворота - слиистая оболочка глотки и кишечника. В развитии
полиомие-лита выделяют четыре фазы: 1-я - энтеральная, 2-я - лимфогенная, 3-я -
вирусемия (протекает в два этапа - первичная и повторная), 4-я - невральная.
Первичное накопление вируса происходит в лимфоглоточном кольце и кишечнике
(энте-ральная фаз а). В последующем вирус размножается в лимфатических
фолликулах задней стенки глотки и мезентериальных лимфатических узлах
(лимфогенная фаза). Следующая фа-за - вирусемия - распространение и размножение
полиовируса во многих органах и тканях: печени, селезенке, легких, сердечной
мышце, костном мозге. В дальнейшем полиовирус вновь поступает в кровь (повторная
вирусемия). В этот период появляются первые симптомы заболевания. Обладая
тропизмом к нервной ткани, вирус проникает в ЦНС через эндотелий мелких сосудов
или по периферическим нервам (невральная фаза). Типично поражение крупных
двигательных нервных клеток (мотонейронов) передних рогов спинного мозга и ядер
двигательных черепных нервов. В оболочках головного и спинного мозга развивается
воспалительный процесс по типу серозного менингита. В течение 1-2 дней
концентрация ви-руса в ЦНС нарастает, а затем начинает быстро падать и вскоре
вирус полностью исчезает. Однако не исключается возможность длительной
персистенции вируса в нейронах. Под влиянием эндо- и экзофакторов возбудитель
может активироваться, что способствует хрони-зации процесса.
Профилактика. Неспецифигеская профилактика полиомиелита включает организацию и
осуществление территориального эпидемиологического надзора за всеми случаями
острых вялых парезов, работу в очагах.
Изоляция больного продолжается не менее 4-6 нед. от начала заболевания. В очаге
прово-дят текущую и заключительную дезинфекцию с использованием дезинфицирующих
средств. На контактных накладывают карантин сроком на 21 день с момента изоляции
больного; осу-ществляется осмотр педиатром (ежедневно) и невропатологом
(однократно). Всем детям до 5 лет, непривитым или привитым с нарушением
календаря профилактических прививок, про-водят экстренную иммунизацию ОПВ.
Для специфигеской профилактики полиомиелита используют два типа вакцин: живую
оральную полиомиелитную вакцину (ОПВ) и инактивированную вакцину. Обе вакцины
могут быть поливалентными, т. е. содержать все 3 типа вируса, или
моновалентными. Монова-лентные вакцины рекомендуется использовать при
эпидемических вспышках, вызванных од-ним из серотипов вируса.
Плановая вакцинация против полиомиелита проводится живой оральной поливалентной
вакциной Сэйбина (ОПВ), которая вызывает выработку гуморального иммунитета, а
также секреторного IgA в кишечнике. Вакцинацию начинают с 3 мес. и проводят
трехкратно с ин-тервалом в 1 мес. Первую ревакцинацию осуществляют в 18 мес,
вторую - в 24 мес, третью - в 6 лет.
Инактивированная вакцина Солка вводится 3-кратно внутримышечно и вызывает выра-
ботку только гуморального иммунитета. В настоящее время чаще используется
моновакцина ("Imovax polio"), либо комбинированная (против дифтерии, столбняка,
коклюша и полиомие-лита) - "Тетракок" фирмы "Смит Кляйн Бичем".
3)вакцины гриппозной тривалентной полимерно-субъединичной жидкой (гриппол).
стерильный раствор протективных поверхностных антигенов гемагглютинина и
нейрамини-дазы, выделенных из очищенных вирусов гриппа типов А и В, в комплексе
с водораствори-мым высокомолекулярным иммуностимулятором N-оксидированным
производным поли-1,4-этиленпиперазина (фармакопейное название - Полиоксидоний).
Консервант - мертиолят.
Назначение. Активная профилактическая иммунизация противгриппа лиц от 6 до 60
лет.