Билет №13.
1) В процессе взаимодействия с АГ участвует лишь антигенсвязывающий центр
(паратоп), который локализован в Fab-фрагменте.
АТ взаимодействует не со всей молекулой АГ сразу, а лишь с ее антигенной
детерминантой (эпитопом).
АТ отличает специфичность взаимодействия, т.е. способность связываться со
строго опре-деленной антигенной детерминантой.
[АГ]+[АТ] =[ИК]
Важное значение имеют особенности АТ и АГ, а также условия, в которых происходит
их взаимодействие.
По сравнению с ковалентными связями силы нековалентного межмолекулярного
взаимодей-ствия по отдельности весьма слабы, однако при большом числе слабых
взаимодействий сум-марная энергия связывания получается значительной. Сила
нековалентной связи зависит прежде всего от расстояния между взаимодействующими
химическими группами.
Свойства АТ:
1.Антигенность АТ
Ig обладает антигенностью и выраженной иммуногенностью. В молекуле
иммуноглобулина различают 4 типа антигенных детерминант: видовые, изотипические,
аллотипические и идиотипические.
Видовые детерминанты характерны для иммуноглобулинов всех особей данного вида,
оп-ределяются строением L- и H-цепей.
Изотипические детерминанты являются групповыми, локализуются в Н-цепи и служат
для дифференцировки семейства иммуноглобулинов на 5 изотипов (классов) и
множество под-классов.
Аллотипические детерминанты являются индивидуальными, располагаются в L- и H-
цепях.
Идиотипические детерминанты отражают особенности строения антигенсвязывающего
центра молекулы Ig, образованы V-доменами L- и H-цепи.
2.Аффинность – прочность связи одного антигенсвязывающего центра с
индивидуальным эпитопом АГ.
Зависит от степени стерического (пространственного) соответствия
(комплементарности) структуры антигенсвязывающего центра и эпитопа.
Наибольшим аффинитетом обладают моноклональные антитела, наименьшим – нормальные
антитела.
Аффинность антител существенно меняется в процессе иммунного ответа в связи с
селекцией наиболее специфичных клонов В-лимфоцитов.
3.Авидность – это прочность связывания АТ и АГ (суммарная сила).
Определяется аффинностью и числом антигенсвязывающих центров. При равной
аффинности наибольшей авидностью обладают антитела класса М, так как они имеют
10 антигенсвя-зывающих центров.
Поливалентность АГ и АТ существенно усиливает прочность их соединения, поскольку
для диссоциации иммунных комплексов необходим разрыв сразу всех связей.
Применительно к физиологическим условиям более адекватно рассматривать
авидность, а не аффинность АТ, поскольку природные АГ обычно поливалентны.
4. Эффективность взаимодействия АГ и АТ
Большое значение имеют стерическая (пространственная) доступность эпитопа для
антиген-связывающего центра Ig и число эпитопов в составе молекулы антигена.
Условия реакции: рН среды, осмотическая плотность, солевой состав и температура
среды. Наиболее приемлемые – физиологические условия внутренней среды
макроорганизма: близ-кая к нейтральной реакция среды, присутствие фосфат-,
карбонат-, хлорид- и ацетат-ионов, осмолярность физиологического раствора,
температура 36—37 °С.
Специфичность антисыворотки суммарно отражает специфичность содержащихся
в ней АТ, в популяции которых может присутствовать множество паратопов,
способных связываться с различными эпитопами или даже с разными частями одного
и того же эпитопа.
Если АГ А имеет общие эпитопы с АГ В, часть АТ, специфичных к А, будет
реагировать также и с В. Этот феномен назван перекрестной реактивностью
Ig – бифункциональная молекула: одна его часть предназначена для связывания с
АГ, дру-гая осуществляет эффекторные функции.
Cвязывание с АГ :
• маркирование АГ, инактивация биологически активных молекул (токсинов),
опсонизация АГ, антителоопосредованный лизис клеток, иммунный фагоцитоз, ГНТ;
• функция антигенспецифического рецептора на поверхности В-лимфоцитов;
Эффекторные функции:
• связывание с тканями организма, различными клетками иммунной системы,
определен-ными фагоцитарными клетками и компонентом комплемента С1q при
активации по класси-ческому пути;
• рецепторы для Ig присутствуют на мононуклеарных лейкоцитах, нейтрофилах,
НК-клетках, эозинофилах,базофилах, тучных клетках;
• перекрестная сшивка АГ АТ, связанных с рецепторами, инициирует
биологическую ак-тивность клетки (фагоцитоз, зависимая от АТ клеточная
цитотоксичность, высвобождение медиаторов и презентация АГ). Нормальные
антитела
В сыворотке крови человека всегда определяется базальный уровень
иммуноглобулинов, ко-торые получили название нормальных, или естественных,
антител.
К нормальным антителам относят изогемагглютинины — антитела, направленные против
эритроцитарных антигенов групп крови (система АВО), а также против бактерий
кишечной группы, кокков и некоторых вирусов.
Эти антитела постоянно образуются в организме без явной антигенной стимуляции. С
одной стороны, они отражают готовность макроорганизма к иммунному реагированию,
а с другой — могут свидетельствовать об отдаленном контакте с антигеном.
Моноклональные антитела
Каждый B-лимфоцит и его потомки (клон), способны синтезировать антитела строго
опреде-ленной специфичности – моноклональные (МКАТ).
Д. Келлер и Ц. Мильштайн (1975) получили гибридные клетки путем слияния иммунных
B-лимфоцитов с миеломной клеткой. Гибридомы обладали специфическими свойствами
ан-тителопродуцента и «бессмертием» раково-трансформированной клетки. Гибридома
хорошо размножается на искусственных питательных средах и в организме животных,
в неограни-ченном количестве продуцируют АТ.
МКАТ широко применяются при создании диагностических и лечебных препаратов
Полные и неполные антитела
Деление основано на способности образовывать в реакции агглютинации или
преципитации (in vitro) хорошо различимую глазом макромолекулярную структуру
гигантского иммунного комплекса. Таким свойством обладают полные антитела. К ним
относятся полимерные мо-лекулы IgМ, а также некоторые IgА и IgG.
Неполные антитела лишены такой способности несмотря на то, что они специфически
свя-зываются с антигеном. В связи с этим их еще называют непреципитирующими (или
блоки-рующими) антителами. Причиной данного явления могут быть экранирование или
дефект второго антигенсвязывающего центра мономерной молекулы иммуноглобулина, а
также не-достаточное число или экранирование антигенных детерминант на молекуле
антигена.
Выявить неполные антитела можно при помощи реакции Кумбса — путем использования
«вторых», антииммуноглобулиновых антител.
Динамика антителопродукции
На проникновение АГ иммунная система реагирует усилением биосинтеза
специфических АТ, что достигается путем размножения клонов АОК. Преимущества
получают клоны с наи-большей аффинностью рецепторных молекул Ig. Параллельно с
размножением идет процесс дифференцировки B-лимфоцитов. Наблюдаются перестройка
в геноме клеток и переключе-ние биосинтеза с крупной высокоавидной молекулы IgМ
на более легкие и экономичные вы-сокоаффинные IgG или IgА.
В латентную фазу антителопродукция остается на базальном уровне. В этот период
проис-ходят переработка и представление АГ иммунокомпетентным клеткам, запуск
пролиферации антигенспецифичных клонов АОК. Параллельно происходит созревание
пре-B-лимфоцитов, дифференцировка в плазматические клетки и переключение
синтезируемых изотипов Ig. По-пытка повторного введения антигена в латентной
фазе может привести к иммунологическому параличу.
Во время логарифмической фазы наблюдается интенсивный прирост числа
антигенспеци-фичных B-лимфоцитов, нарастание специфических АТ.
В стационарной фазе количество специфических антител и синтезирующих их клеток
дос-тигает максимума и стабилизируется. Освобождение макроорганизма от антигена
устраняет антигенный стимул, и начинается фаза снижения: постепенное уменьшение
клонов специ-фических АОК и титров соответствующих АТ.
При первичном контакте с антигеном развивается первичный иммунный ответ:
длительная латентная (3 – 5 сут) и логарифмическая (7 – 15 сут) фазы. Первые
диагностически титры АТ регистрируются на 10 – 14-е сутки. Стационарная фаза –
15 – 30 сут, а фаза снижения – 1 – 6 мес.
В итоге первичного иммунного реагирования формируются многочисленные клоны
антиген-специфичных антителопродуцирующих клеток (B-лимфоциты иммунологической
памяти), а во внутренней среде макроорганизма в высоком титре накапливаются
специфические IgG и/или IgА.
Повторный контакт иммунной системы с тем же антигеном ведет к формированию
вторич-ного иммунного ответа: укороченная латентная фаза – от нескольких часов
до 1 – 2 сут. Логарифмическая фаза отличается более интенсивной динамикой
прироста и более высокими титрами АТ.
Стационарной фазе и фазе снижения свойственна затяжная динамика (несколько
месяцев или даже лет).При вторичном иммунном ответе в организме сразу же
синтезируется IgG.
2) Нет,необходимо было взять и кровь для исследоваения(серология)
Микробиологическая диагностика. Бактериоскопический метод: окраска по Граму
мазков из патологического материала может быть полезна для предварительного
диагноза
инфекций, вызванных стрептококками группы А. Определение стрептококковых
антигенов в патологическом материале (из респираторного тракта) с помощью ИФА
или латекс-агглютинации. Бактериологический метод: проводят идентификацию
мелких блестящих ко-лоний, выросших на кровянном агаре. Серологический метод:
определяют антитела против стрептококка группы А (антистрептолизин 0, против
ДНК-азы и других антигенов).
Бактериологическое исследование. Исследуемый материал засевают на кровяной агар
в чашку Петри. После инкубации при 37°С в течение 24 ч изучают характер колоний
и наличие вокруг них зон гемолиза. Из части материала, взятого из колоний,
готовят мазок, окрашивают по Граму и микроскопируют. Для получения чистой
культуры 2—3 подозрительные колонии пересевают в пробирки со скошенным кровяным
агаром и сахарным бульоном.
На кровяном агаре Str. pyogenes образуют мелкие, величиной с булавочную головку,
мут-новатые круглые колонии. В бульоне стрептококк в отличие от стафилококка
дает придонно-присте-ночный рост в виде хлопьев или зерен, оставляя всю среду
прозрачной.
По характеру гемолиза на кровяном агаре стрептококки делят на три группы: 1)
негемоли-тические; 2) а-гемолитические, или зеленящие, образующие зеленоватую
зону частичного гемолиза; 3) р-гемолитические, образующие вокруг колонии
полностью прозрачную зону ге-молиза.
Заключительным этапом бактериологического исследования является идентификация
выде-ленной культуры по антигенным свойствам . Серогруппу стрептококков
определяют в реак-ции преципитации с полисахаридным приципитиногеном С,
выделенным из исследуемой культуры, и сыворотками (обычно четырех наиболее
распространенных серогрупп: А, В, С и D .Серовар стрептококков определяют в
реакции агглютинации. Развернутое серологическое исследование и типирование
стрептококков проводят главным образом при эпидемиологиче-ском обследовании.
Выделенную культуру стрептококка проверяют на чувствительность к антибиотикам
методом дисков .
При подозрении на сепсис делают посевы крови больного . Инкубируют посевы
длитель-ный срок (до 3 нед).
Серодиагностика. При отдельных нозологических формах ^стрептококковой инфекции с
помощью РСК или реакции преципитации устанавливают наличие специфических
антигенов в крови больного. Антитела к О-стрептолизину определяют главным
образом для подтвер-ждения диагноза ревматизма. Реакция основана на
нейтрализации способности О-стрептоли-зина растворять эритроциты в случае
наличия в крови больного соответствующих антител. Реакцию ставят со стандартным
сухим О-стрептолизином.
3) Иммуноглобулин человека нормальный.
Состав – 10%-ный раствор иммунологически активной фракции сыворотки крови
человека. Содержание иммуноглобулина G составляет не менее 97% от общего белка.
Препарат не со-держит биологически активных примесей, консервантов и
антибиотиков. Вирусологически безопасен.
Выпускается в ампулах по 1,5 мл в жидком виде.
Назначение – для профилактики гепатита А, кори, гриппа, коклюша, менингококковой
ин-фекции, полиомиелита, повышения резистентности организма в период
реконвалесценции после инфекционных заболеваний. Действующим началом препарата
являются иммуногло-булины, обладающие активными антителами различной
специфичности.
Способ применения и дозировка. Препарат вводят внутримышечно. Доза и кратность
вве-дения зависит от показаний к применению.
Профилактика гепатита А – препарат вводится однократно в дозах: детям
дошкольного возраста 0,75 мл, остальным возрастным группам, в том числе
беременным женщинам 1,5 мл.
Профилактика кори – препарат вводится однократно детям с 3-месячного возраста,
не бо-левшим корью и не привитым против этой инфекции, не позднее 6 суток после
контакта с больным. Доза препарата 1,5 мл или 3,0 мл в зависимости от состояния
здоровья ребенка и времени, прошедшего с момента контакта.
Взрослым и детям при контакте со смешанными инфекциями препарат вводят в дозе
3,0 мл.
Профилактика и лечение гриппа: препарат вводят однократно в дозах: детям до 2-х
лет — 1,5 мл, от 2 до 7 лет —3 мл, старше 7 лет и взрослым — 4,5-6 мл. При
лечении тяжелых форм гриппа показано повторное (через 24—48 час) введение
иммуноглобулина в той же дозе.
Профилактика коклюша: препарат вводят двукратно с интервалом 24 часа в дозе 3,0
мл де-тям, не болевшим коклюшем (подлежат профилактике дети первого года жизни;
в возрасте от 1 года до 6 лет, не привитые против коклюша), ослабленным детям.
Профилактика менингококковой инфекции: вводят однократно детям в возрасте от 6
ме-сяцев до 7 лет в дозах 1,5—3,0 мл.
Профилактика полиомиелита: препарат вводят однократно в дозах 3,0—6,0 мл
неприви-тым или неполноценно привитым полиомиелитной вакциной детям.
Прививочные реакции на введение иммуноглобулина, как правило, отсутствуют.
Противопоказано введение препарата лицам, имевшим в анамнезе тяжелые
аллергические реакции.